（1）临床诊断:生长过速而叶酸供给不足、机体对叶酸的需要量增多或消化道吸收障碍时均可导致叶酸缺乏病。如果经常使用叶酸拮抗剂的药物如甲氨蝶呤能影响细胞摄取叶酸和抑制二氢叶酸还原酶的作用，阻碍四氢叶酸的形成；长期服用抗癫痫药物如苯妥英钠、扑米酮均可影响叶酸的吸收，乙胺嘧啶、异烟肼也有抑制二氢叶酸还原酶的作用可引起叶酸缺乏。
叶酸缺乏症的主要表现为贫血，其他如舌炎、舌痛、舌乳头萎缩、舌面光滑、口角炎及食欲减退。妊娠前一个月及妊娠初三个月内口服叶酸可预防胎儿神经管畸形。叶酸在新鲜蔬菜中含量最多，肝、肾、酵母中的含量也较多，而肉类、乳类中的含量较少。叶酸缺乏病的临床表现与维生素B12缺乏表现相似，但叶酸缺乏病时无神经系统的症状及体征。
（2）实验室诊断方法的评价:采用微生物法测定血清叶酸是不稳定的，仅作为一种参考方法。血清中存在的抗生素、叶酸盐拮抗物、血清乳酸杆菌抗体或样品暴露在日光下，均可使测定值呈假性降低。放射竞争性蛋白结合技术是较为有效、快速与精密的测定方法，目前已广泛应用。化学发光技术是最先进的方法，可同时测定叶酸及维生素B12。红细胞叶酸测定是诊断慢性叶酸缺乏病的较好指标，反映了组织内叶酸的营养状态。
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